Kizuizi cha Rnase (isiyo na Glycerol)
Kizuizi cha murine RNase ni kizuia tena cha murine RNase kilichoonyeshwa na kusafishwa kutoka kwa E.coli.Inafunga kwa RNase A, B au C katika uwiano wa 1: 1 kupitia ushirikiano usio na ushirikiano, na hivyo kuzuia shughuli za vimeng'enya vitatu na kulinda RNA kutokana na uharibifu.Hata hivyo, Haifai dhidi ya RNase 1, RNase T1, S1 Nuclease, RNase H au RNase kutoka Aspergillus.Kizuizi cha Murine RNase kilijaribiwa na RT-PCR, RT-qPCR na IVT mRNA, na kiliendana na nakala mbalimbali za kibiashara za Reverse transcriptases, polima za DNA na polima za RNA.
Ikilinganishwa na vizuizi vya binadamu vya RNase, kizuizi cha murine RNase haina cysteines mbili ambazo ni nyeti sana kwa oxidation ambayo husababisha kutofanya kazi kwa kizuizi.Hiyo inaifanya kuwa thabiti katika viwango vya chini vya DTT (chini ya 1 mM).Kipengele hiki kinaifanya kufaa kutumika katika athari ambapo viwango vya juu vya DTT ni kinyume na athari (km RT-PCR ya muda halisi).
Amaombi
Bidhaa hii inaweza kutumika sana katika jaribio lolote ambapo uingiliaji wa RNase unawezekana ili kuepuka uharibifu wa RNA, kama vile:
1.Mchanganyiko wa cDNA wa kwanza, RT-PCR, RT-qPCR, nk;
2.Linda RNA dhidi ya uharibifu katika unukuzi/tafsiri ya ndani ya mwonekano (km urudufu wa virusi katika vitro);
3.Kuzuia shughuli za RNase wakati wa kutengwa na utakaso wa RNA.
Masharti ya Uhifadhi
Hifadhi kwa -25～-15℃;
Mizunguko ya kufungia-thaw ≤ mara 5;
Inatumika kwa mwaka 1.
Ufafanuzi wa kitengo
Sehemu moja inafafanuliwa kuwa kiasi cha Kizuizi cha RNase kinachohitajika kuzuia shughuli ya 5 ng ya RNase A kwa 50%.
Uzito wa Masi
Kizuizi cha RNase (isiyo na Glycerol) ni protini ya 50 kDa.
Udhibiti wa ubora
Exonuclease Shughuli:
Uamilisho wa 40 U ya kimeng'enya na 1 μg λ-Hind III ya DNA ya kusaga kwa saa 16 katika 37°C haukusababisha uharibifu wowote wa DNA kama ilivyoamuliwa na gel electrophoresis.
Shughuli ya Endonuclease:
Uamilisho wa 40 U ya kimeng'enya na 1 μg λ DNA kwa saa 16 kwa 37°C haukusababisha uharibifu unaoweza kugunduliwa wa DNA kama ilivyoamuliwa na gel electrophoresis.
Kuchezea Shughuli:
Uamilisho wa 40 U ya kimeng'enya na 1 μg pBR322 kwa saa 16 katika 37℃ ulisababisha kutoweza kugundulika kwa uharibifu wa DNA kama ilivyoamuliwa na gel electrophoresis.
RNase Shughuli:
Uamilisho wa 40 U ya kimeng'enya na 1.6 μg MS2 RNA kwa saa 4 katika 37℃ ulisababisha kutoweza kugundulika kwa uharibifu wa RNA kama inavyobainishwa na gel electrophoresis.
E.coli DNA:
40 U ya Enzyme imegunduliwa na TaqMan qPCR.DNA ya E.coli ni ≤ 0. 1pg/40U.
Notes
1.Usitikisike au kukoroga kwa nguvu ili kuzuia ufanyaji kazi wa kimeng'enya.
Kizuizi cha 2.RNase hufanya kazi katika halijoto ya kuanzia 25℃ hadi 55℃ na imezimwa kwa ≥65℃.
3.Shughuli ya RNase H, RNase 1, na RNase T1 haijazuiliwa.
4. Kiwango cha pH cha kuzuia shughuli za RNase ni pana (inafanya kazi katika pH 5-9), kinaonyesha shughuli ya juu zaidi katika pH 7-8.
