Multiplex One Step RT-qPCR Premix-UNG
Nambari ya paka: HCB5145A
Multiplex One Step RT-qPCR Probe Kit (UDG Plus) ni kifurushi cha PCR cha wingi kulingana na RNA kama kiolezo.Katika mchakato wa jaribio, unukuzi wa kinyume na PCR ya kiasi ilifanywa katika bomba moja, ambayo imerahisisha operesheni ya majaribio na kupunguza hatari ya kuambukizwa.Katika kisanduku hiki, safu ya kwanza ya cDNA iliundwa kwa ufanisi na Reverse Transcriptase inayostahimili joto na kuimarishwa kwa kiasi na HotStart Tag DNA Polymerase.Seti hii ina bafa ya MP iliyoboreshwa, mchanganyiko wa vimeng'enya, n.k. Suluhisho la bafa tayari lina Mg.2+na dNTP.Kwa kuongeza, mambo ambayo yanaweza kuzuia ukuzaji wa PCR isiyo maalum na kuboresha ufanisi wa ukuzaji wa athari nyingi za qPCR huongezwa, ambayo inaweza kuhakikisha ufanisi wa ukuzaji na kutekeleza hadi athari nyingi za ukuzaji.Mfumo wa dUTP/UDG uliongezwa ili kuzuia kwa ufanisi hatari ya uchafuzi wa erosoli.
Vipengele
1. Bafa
2. Mchanganyiko wa Enzyme
Vipimo
| Moto Anza | Mwanzo wa moto uliojengwa ndani |
| Mbinu ya kugundua | Utambuzi wa uchunguzi wa awali |
| Mbinu ya PCR | Hatua moja RT-qPCR |
| Polymerase | Taq DNA polymerase |
| Aina ya sampuli | DNA |
Masharti ya Uhifadhi
Bidhaa hiyo inasafirishwa na barafu kavu na inaweza kuhifadhiwa kwa -25 ~ -15 ℃ kwa mwaka 1.Inapaswa kuepuka mara kwa marakufungia-yeyuka.Inashauriwa kuokoa tofauti.
Maagizo
1.Mwitikio Mfumo
| Vipengele | Kiasi (μL) | Umakini wa Mwisho |
| 2 × Mbunge Buffer | 12.5 | 1× |
| Mchanganyiko wa Enzyme | 1 | - |
| Mchanganyiko wa Primer/Probe (2.5 μM) | 3 | 0.3μM |
| Kiolezo cha RNA | 1-10 | - |
| RNase Bure H2O | hadi 25 | - |
Vidokezo:
Hakikisha kuchanganya vizuri kabla ya matumizi, epuka Bubbles nyingi zinazosababishwa na mtetemo mkali.
a.Mkusanyiko wa primer: Mchanganyiko wa primer ikiwa ni pamoja na primer multiplex, kulingana na hali mojawapo ya mkusanyiko wa primer labda kati ya 0.l na 1.0μM.
b.Ukolezi wa uchunguzi: Mchanganyiko wa uchunguzi unaojumuisha kikundi cha uwekaji lebo ya umeme wa wingi wa probe, kulingana na hali mkusanyiko bora wa uchunguzi labda kati ya 0.05 na 0.5μM.
c.Upunguzaji wa kiolezo: qPCR ni nyeti sana na inashauriwa kupunguza kiolezo.Thamani ya Ct ya udhibiti inafaa kati ya 20 na 35.
d.Maandalizi ya mfumo: Tafadhali jitayarishe kwenye jedwali safi kabisa la kufanya kazi, na bomba na bomba la majibu bila mabaki ya nyuklia;inashauriwa kutumia kichwa cha bunduki na kipengele cha chujio.Epuka uchafuzi wa msalaba na uchafuzi wa erosoli.
2. Uendeshaji Baiskeli UlioboreshwaItifaki
| Mzunguko hatua | Muda. | Wakati | Mizunguko |
| Unukuzi wa kinyume | 50℃a | Dakika 20 | 1 |
| Awali-denaturation | 95℃ | Dakika 5 | 1 |
| Mwitikio wa ukuzaji | 95℃ | 15sek |
40-45 |
| 60 ℃ b | 30sek c |
Vidokezo:
a.Unukuzi wa kinyume: Halijoto inaweza kuchagua 42°C au 50°C.
b.Mwitikio wa ukuzaji: Halijoto hurekebishwa kulingana na thamani ya Tm ya viasili vilivyoundwa.
c.Upataji wa mawimbi ya Fluorescence:Tafadhali weka utaratibu wa majaribio kulingana na mahitaji ya mwongozo wa chombo.
Vidokezo
Tafadhali vaa PPE inayohitajika, kama vile koti la maabara na glavu, ili kuhakikisha afya na usalama wako.
