RT-LAMP Colormetric Master Mix HCB5204A
Bidhaa hii ina bafa ya athari, Mchanganyiko wa RT-Enzymes (Bst DNA polymerase na reverse transcriptase inayostahimili joto), Protectants zenye lyophilized na vijenzi vya rangi vya kromojeni.Kutumia, tumia tu Buffer, enzyme ya majibu na primer huchanganywa na kuongezwa kwenye template;kuongeza kinga ya lyophilized inaweza kuwa sawa.Iliunganishwa na lyophilizer na lyophilized, na tu primers na templates walikuwa aliongeza wakati kutumika.Kiti hiki hutoa ugunduzi wa haraka, wazi wa kuona wa amplification, ambayo majibu hasi yanaonyeshwa kwa majibu nyekundu na chanya yanaonyeshwa na mabadiliko ya njano.
Sehemu
| Sehemu | HCB5204A-01 | HCB5204A-02 | HCB5204A-03 |
| Bafa ya Kukuza Upatanishi wa Kitanzi (yenye rangi) | 0.96 ml | mililita 4.80×2 | 9.60 ml×10 |
| Mchanganyiko wa Enzymes za RT | 270 μL | 2.70 ml | 2.70 ml×10 |
| Kinga ya Lyophilized | mililita 0.96×2 | mililita 9.60×2 | 9.60 ml×20 |
Maombi
Kwa DNA au RNA isothermal amplification.
Masharti ya Uhifadhi
Husafirishwa kwa Barafu Kavu, iliyohifadhiwa kwa -25~ -15℃.Epuka kufungia mara kwa mara, bidhaa ni halali kwa miezi 12.
Itifaki
1.Nyeyusha bafa ya athari itakayotumika kwenye halijoto ya kawaida.Vortex kwa muda mfupi au pindua zilizopo mara kadhaa ili kuchanganya vizuri, kisha centrifuge kukusanya kioevu chini ya bomba.
2.Maandalizi ya mfumo wa mmenyuko.Reagent hii inaweza kutayarishwa katika mifumo miwili ya mmenyuko, mchanganyiko wa majibu ya kioevu na mchanganyiko wa mfumo wa lyophilized.
1) Tayarisha mchanganyiko wa majibu ya kioevu
| Sehemu | Kiasi |
| Bafa ya Kukuza Upatanishi wa Kitanzi (yenye rangi) | 10 μL |
| Mchanganyiko wa Enzymes za RT | 2.8 μL |
| 10 × Mchanganyiko wa Primera | 5 μL |
| Violezo vya DNA/ RNA b | × μL |
| Maji yasiyo na nyuklia | Hadi 50 μL |
2) Mchanganyiko wa mfumo wa Lyophilization
① Tayarisha mchanganyiko wa lyophilized
| Sehemu | Kiasi |
| Bafa ya Kukuza Upatanishi wa Kitanzi (yenye rangi) | 10 μL |
| Kinga ya Lyophilized | 20 μL |
| Mchanganyiko wa Enzymes za RT | 2.8 μL |
| Maji yasiyo na nyuklia | Hadi 50 μL |
② Lyophilization: Mchanganyiko uliotayarishwa ulifanywa lyophilized katika mfumo wa 50μL
③ Tayarisha mchanganyiko wa majibu
| Sehemu | Kiasi |
| Mchanganyiko wa Lyophilized | kipande 1 |
| 10 × Mchanganyiko wa Primera | 5 μL |
| Violezo vya DNA/ RNA b | × μL |
| Maji yasiyo na nyuklia | Hadi 50 μL |
Vidokezo:
1) a.10×Primer Mix : 16 μM FIP/BIP, 2 μM F3/B3, 4 μM Kitanzi F/B;
2) b.DEPC (mumunyifu wa maji) inapendekezwa kwa templ ya asidi ya nucleic.
1.Ingiza ifikapo 65°C kwa dakika 30-45, ambayo inaweza kupanuliwa ipasavyo kulingana na mabadiliko ya rangi Wakati wa majibu.
2.Kulingana na jicho uchi, njano ilikuwa chanya na nyekundu ilikuwa hasi.
Vidokezo
1.Chumvi inaweza kuonekana chini ya bomba la buffer, vortex kwa muda mfupi au geuza mirija mara kadhaa ili ichanganyike vizuri kwenye joto la kawaida.
2.Joto la mmenyuko linaweza kuboreshwa kati ya 62 ℃ na 68 ℃ kulingana na hali ya viunzi.
3.Vitendanishi vilivyowekwa vifurushi havipaswi kuonyeshwa kwa hewa kwa muda mrefu.
4.Mmenyuko wa kubadilika rangi nyekundu na njano hutegemea mabadiliko ya pH ya mfumo wa mmenyuko, tafadhali usitumie suluhu iliyo na Tris nucleic acid ya kuhifadhi, inayopendekezwa kutumia ddH.2O asidi ya nucleic iliyohifadhiwa;
5.Jaribio linapaswa kusawazishwa, ikijumuisha utayarishaji wa mfumo wa majibu, lyophilization, na usindikaji wa sampuli na mchakato wa kuongeza sampuli;
6.Ili kuepuka uchafuzi, inashauriwa kuandaa mfumo wa majibu katika benchi safi zaidi, kwa nyingine Ongeza violezo kwenye kofia ya moshi ya chumba ili kuepuka kuingiliwa kwa uongo.
