Multiplex qPCR Probe Premix
Nambari ya paka: HCB5051A
TaqMan multiplex qPCR Master Mix (Dye Based) ni suluhu la awali la ukuzaji wa PCR wa 2 × wa muda halisi wenye unyeti wa hali ya juu na umaalum, ambao una rangi ya buluu, na una athari ya kuongeza sampuli.Bidhaa hii ni kitendanishi kilichochanganyika cha 2× Mix ambacho huwezesha hadi miitikio minne ya kipimo cha PCR ya fluorescent katika mwitikio mmoja vizuri.Bidhaa hii ina mbinu ya kingamwili iliyobadilishwa vinasaba ya kuanzisha kimeng'enya cha Taq, ikiboresha sana usikivu na umaalum wa ukuzaji.Wakati huo huo, bidhaa hii imeboresha kwa undani bafa yenye athari nyingi, ambayo inaweza kuboresha ufanisi wa ukuzaji wa majibu na kukuza upanuzi mzuri wa violezo vya umakini wa chini.Bidhaa hii inaweza kutumika kwa uchanganuzi wa upimaji wa jeni na wingi wa x.
Vipimo
| Moto Anza | Mwanzo wa moto uliojengwa ndani |
| Mbinu ya kugundua | Utambuzi wa uchunguzi wa awali |
| Mbinu ya PCR | qPCR |
| Polymerase | Taq DNA polymerase |
| Aina ya sampuli | DNA |
Masharti ya Uhifadhi
Bidhaa hiyo inasafirishwa na barafu kavu na inaweza kuhifadhiwa kwa -25 ~ -15 ℃ kwa miaka 2.
Maagizo
1. MwitikioMfumo
| Vipengele | Kiasi (μL) | Umakini wa Mwisho |
| 2× TaqMan multiplex qPCR Master Mix | 12.5 | 1× |
| Mchanganyiko wa primer (10 μmol/L) a | × | 0.1 - 0.5 μmol/L |
| Mchanganyiko wa uchunguzi (10 μmol/L)b | × | 50 - 250 nmol/L |
| Rangi ya kumbukumbu ya Rox | 0.5 | 1× |
| Kiolezo cha DNA/cDNA | 1-10 | - |
| ddH2O | hadi 25 | - |
Vidokezo:Changanya vizuri kabla ya matumizi ili kuepuka Bubbles nyingi kutoka kwa kutetemeka kwa nguvu.
a.Mkusanyiko wa Primer: Mchanganyiko wa Primer una jozi nyingi za vianzio, kwa kawaida kila primer katika mkusanyiko wa mwisho wa 0.2 μmol/L na inaweza pia kubadilishwa kati ya 0.1 na 0.5 μmol/L inavyofaa.
b.Mkusanyiko wa probe: Mchanganyiko wa Probe una vichunguzi vingi vilivyo na ishara tofauti za umeme, na mkusanyiko wa kila uchunguzi unaweza kurekebishwa kati ya 50 na 250 nmol/L kulingana na hali mahususi.
1.Rejeleo la rangi ya Rox:Inatumika kwenye zana ya ukuzaji ya PCR ya Wakati Halisi kama vile Mifumo ya Kihai Inayotumika kurekebisha hitilafu ya mawimbi ya umeme yanayotolewa kati ya visima;bidhaa hii haina marejeleo ya rangi ya Rox.Cas#10200 inapendekezwa ikihitajika.
2.Upunguzaji wa kiolezo: qPCR ni nyeti sana, na inashauriwa kupunguza kiolezo kwa matumizi.Ikiwa kiolezo ni suluhisho la hisa la cDNA, ujazo wa kiolezo haupaswi kuzidi 1/10 ya jumla ya ujazo.
3.Mfumo wa kuitikia: 25μL, 30μL au 50 μL inapendekezwa ili kuhakikisha ufanisi na kurudiwa kwa ukuzaji wa jeni lengwa.
4.Maandalizi ya mfumo: Tafadhali jitayarishe katika benchi safi kabisa, na utumie vidokezo na mirija ya majibu bila mabaki ya viini;inashauriwa kutumia vidokezo na cartridges za chujio.Epuka uchafuzi wa msalaba na uchafuzi wa erosoli.
2.Mpango wa majibu
| Hatua ya mzunguko | Muda. | Wakati | Mizunguko |
| Awali-denaturation | 95 ℃ | Dakika 5 | 1 |
| Denaturation | 95 ℃ | 15sek | 45 |
| Annealing/Upanuzi | 60 ℃ | 30sek |
Vidokezo:
1.Ufungaji/Upanuzi: Halijoto na wakati vinaweza kurekebishwa ipasavyo kulingana na thamani ya kitangulizi cha Tm iliyoundwa.
2.Upataji wa mawimbi ya fluorescence: Muda wa kupata mawimbi ya umeme unaohitajika kwa zana tofauti za kutambua qPCR ni tofauti, tafadhali weka kulingana na muda wa chini zaidi.Wakati wa vyombo kadhaa vya kawaida umewekwa kama ifuatavyo:
Sekunde 20: Mifumo ya Kihai Inayotumika 7700, 7900HT, 7500 Haraka
Sekunde 31: Mifumo ya Kihai Unayotumika 7300
Sekunde 32: Mifumo ya Kihai Inayotumika 7500
Vidokezo
Tafadhali vaa PPE inayohitajika, koti kama hilo la maabara na glavu, ili kuhakikisha afya yako na usalama!
