2×PCR Master Mix (bila Rangi)
PCR Master Mix ni aina ya suluhu ya kawaida iliyochanganywa ya PCR ambayo iko tayari kutumika, ikijumuisha Taq DNA Polymerase, mchanganyiko wa dNTP MgCl2 na bafa iliyoboreshwa.Wakati wa majibu, tu primer na template inaweza kuongezwa kwa amplification, ambayo hurahisisha sana hatua za uendeshaji wa majaribio.Bidhaa hii ina vidhibiti bora na inaweza kuhifadhiwa kwa miezi 3 kwa 4 ℃.Bidhaa ya PCR ina mbenuko ya 3′-dA na inaweza kutengenezwa kwa urahisi kuwa T vekta.
Masharti ya Uhifadhi
Bidhaa inapaswa kuhifadhiwa kwa -25 ℃ ~ -15 ℃ kwa miaka miwili.
Vipimo
| Uaminifu (dhidi ya Taq) | 1× |
| Moto Anza | No |
| Overhang | 3′-A |
| Polymerase | Taq DNA Polymerase |
| Umbizo la Mwitikio | SuperMix au Master Mix |
| Kasi ya Mwitikio | Kawaida |
| Aina ya Bidhaa | Mchanganyiko Mkuu wa PCR (2×) |
Maagizo
1.Mfumo wa Majibu
| Vipengele | Ukubwa (μL) |
| DNA ya Kiolezo | Inafaa |
| Primer 1 (10 μmol/L) | 2 |
| Primer 2 (10 μmol/L) | 2 |
| Mchanganyiko wa PCR Master | 25 |
| ddH2O | Hadi 50 |
2.Itifaki ya Ukuzaji
| Hatua za mzunguko | Halijoto (°C) | Wakati | Mizunguko |
| Pre-denaturation | 94 ℃ | Dakika 5 | 1 |
| Denaturation | 94 ℃ | 30 sek | 35 |
| Annealing | 50-60 ℃ | 30 sek | |
| Ugani | 72 ℃ | 30-60sec/kb | |
| Ugani wa Mwisho | 72 ℃ | Dakika 10 | 1 |
Vidokezo:
1) Matumizi ya kiolezo: 50-200 ng genomic DNA;0.1- 10 ng DNA ya plasmid.
2) Mg2+ukolezi: Bidhaa hii ina 3 mm ya MgCl2 inayofaa kwa athari nyingi za PCR.
3) Halijoto ya kuongeza: Tafadhali rejelea thamani ya kinadharia ya Tm ya Primers.Halijoto ya annealing inaweza kuwekwa kuwa 2-5 ℃ chini kuliko thamani ya kinadharia ya primer.
4) Muda wa nyongeza: Kwa kitambulisho cha molekuli, 30 sec/kb inapendekezwa.Kwa uundaji wa jeni, 60sec/kb inapendekezwa.
Vidokezo
1.Kwa usalama na afya yako, tafadhali vaa makoti ya maabara na glavu zinazoweza kutumika kwa uendeshaji.
2.Kwa matumizi ya utafiti tu!
