Peroxidase (Chanzo cha Horseradish) Kisawe: oxidoreductase ya peroxide ya hidrojeni;HRP
Maelezo
Horseradish peroxidase (HRP) imetengwa na mizizi ya horseradish (Amoracia rusticana) na ni ya kundi la ferroprotoporphyrin la peroxidases.HRP inachanganya kwa urahisi na peroxide ya hidrojeni (H2O2).Mchanganyiko wa matokeo [HRP-H2O2] unaweza kuongeza oksidi anuwai ya wafadhili wa hidrojeni:
Mfadhili + H2O2 → Mfadhili aliyeoksidishwa + 2 H2O
HRP itaoksidisha substrates mbalimbali (tazama Jedwali 1):
• Chromogenic
• Chemiluminescent (kama vile luminol au isoluminol)
• Fluorogenic (kama vile tyramine, homovanillic acid, au 4-hydroxyphenyl asetiki)
HRP ni polipeptidi ya mnyororo mmoja ambayo ina madaraja manne ya disulfidi.HRP ni glycoprotein ambayo ina 18% ya kabohaidreti.Muundo wa kabohaidreti una galactose, arabinose, xylose, fucose, mannose, mannosamine, na galactosamine, kutegemea isozimu maalum.
HRP ni lebo inayotumika sana kwa immunoglobulini katika matumizi mengi tofauti ya kingamwili, ikijumuisha kuzuia kinga mwilini, immunohistochemistry, na ELISA.HRP inaweza kuunganishwa na kingamwili kwa mbinu kadhaa tofauti, ikiwa ni pamoja na glutaraldehyde, oksidi ya muda, kupitia vifungo vya disulfidi, na pia kupitia viunganishi vya amino na thiol vinavyoelekezwa.HRP ndiyo lebo inayotakikana zaidi ya kingamwili, kwa kuwa ndiyo lebo ndogo na thabiti zaidi kati ya lebo tatu za kimeng'enya maarufu zaidi (peroxidase, β-galactosidase, phosphatase ya alkali) na ulainishaji wake husababisha uunganishaji wa chini usio maalum.Mapitio ya mbinu za kuunganisha glutaraldehyde na periodate imechapishwa.
Peroxidase pia hutumika kuamua sukari4 na peroksidi katika suluhisho.Machapisho kadhaa, nadharia 6-24, 25-29 na tasnifu 30-46 zimetaja matumizi ya P8375 katika itifaki zao za utafiti.
Muundo wa Kemikali
Vipimo
Vipengee vya Mtihani | Vipimo |
Maelezo | Poda ya amorphous nyekundu-kahawia, lyophilized |
Shughuli | ≥100U/mg |
Usafi(SDS-PAGE) | ≥90% |
Umumunyifu (10mg poda/ml) | Wazi |
Kuchanganya enzymes | |
NADH/NADPH oxidase | ≤0.1% |
Kikatalani | ≤0.005% |
ATPase | ≤0.03% |
Usafirishaji na uhifadhi
Usafiri:Inasafirishwa chini ya 2-8°C
Hifadhi:Hifadhi kwa -20°C(Muda mrefu), 2-8°C(Muda mfupi)
Jaribio upya linalopendekezwaMaisha:2 mwaka